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組織蛋白酶K試劑盒在骨質(zhì)疏松發(fā)揮的作用
2015-03-12 瀏覽次數(shù)：1681
一.組織蛋白酶K試劑盒簡介：
定量測(cè)定人血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中由破骨細(xì)胞分泌出的組織蛋白酶K。組織蛋白酶K降解骨膠原基質(zhì)，是zui豐富的活化和吸收破骨細(xì)胞的合成蛋白，也是吸收活性的特異性標(biāo)志物。蛋白酶K在組織溶解、重建和骨膠原降解中具有重要作用。組織蛋白酶K在不同物種間的高同源性(小鼠86%，大鼠88%，豬97%，兔96%)，因此試劑盒也能用于動(dòng)物模型的研究。
二.組織蛋白酶K試劑盒臨床應(yīng)用：
- 骨轉(zhuǎn)換研究
- 惡性骨疾病
- 應(yīng)用于腫瘤學(xué)
- 監(jiān)測(cè)骨吸收藥物的療效
- 預(yù)防糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松
- 預(yù)防原發(fā)性和繼發(fā)性骨質(zhì)疏松
- 監(jiān)測(cè)作用于骨骼多個(gè)區(qū)域的炎癥疾病
- 監(jiān)控治療如激素替代治療，雙膦酸鹽治療
- 監(jiān)測(cè)風(fēng)濕性骨關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎的治療療效
- 蛋白酶k與骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變關(guān)系密切，特別在早期發(fā)病中有重要作用
三.組織蛋白酶K試劑盒樣本制備：
1. 病人在平臥安靜狀態(tài)下進(jìn)行靜脈取血。采血量一般為2-3 ml。
2. 分析標(biāo)本可以是血清，或是細(xì)胞培養(yǎng)清液。
3. 室溫下，90分鐘內(nèi)離心分離并分析標(biāo)本。建議的離心分離條件是：4°C下2000轉(zhuǎn)離心15分鐘。
4. 在4°C標(biāo)本可以保存2天。
5. 若長時(shí)間保存標(biāo)本，可在-20°C 下或在-70°C的條件下存放。zui多進(jìn)行4次解凍。
血脂標(biāo)本或溶血標(biāo)本會(huì)引起結(jié)果錯(cuò)誤，因此，分析之前必須充分混合標(biāo)本。
四.組織蛋白酶K試劑盒操作步驟：
1 沖洗緩沖液（WASHBUF）：
1. 稀釋濃縮洗液，稀釋比例為1：20，即 50 ml 洗液中加入 950 ml 蒸餾水。
2. 濃縮液中的晶體可在室溫下溶解。
3. 沖洗緩沖液在2°C - 8°C條件下穩(wěn)定，4. 在標(biāo)5. 注的有效期限內(nèi)都可使用。
6. 分析時(shí)只能使用稀釋后的洗液緩沖液。
3 標(biāo)準(zhǔn)液（STD）：
1. 在每個(gè)瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液；
2. 在室溫下（18-26°C）放置20分鐘；
3. 在VORTEX MIXER上充分混勻；
4. 標(biāo)準(zhǔn)液若要分幾次使用，建議分裝保存，避免冷凍－解凍過程；5. 配制好的標(biāo)準(zhǔn)液在-20°C下穩(wěn)定，可在有效期內(nèi)使用；
6. 一定不要將標(biāo)準(zhǔn)液在室溫下放置
4 質(zhì)控液（CTRL）：
5 在每個(gè)瓶中加入1ml的ASYBUF分析緩沖液；
6 在室溫下（18-26°C）放置20分鐘；
7 在VORTEX MIXER上充分混勻；
8 質(zhì)控液若要分幾次使用，建議分裝保存，避免冷凍－解凍過程；
9 配制好的質(zhì)控液在-20°C下穩(wěn)定，可在有效期內(nèi)使用；
10 一定不要將質(zhì)控液在室溫下放置。
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