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產(chǎn)品展示 / PRODUCTS
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SRANKL試劑盒
名稱 SRANKL試劑盒
型號
更新時間 2023-10-13
特點(diǎn) SRANKL試劑盒是一種酶聯(lián)放大的兩步夾心法免疫檢測試劑盒。在此實(shí)驗(yàn)中,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和未知樣品在包被了抗IGFBP-3單克隆抗體的微孔板中溫育。溫育之后洗板,再加入辣根過氧酶標(biāo)記的抗IGFBP-3抗體。第二次溫育后再洗板,再向微孔中加入TMB底物液。之后再加入酸性終止液,用雙波長450nm和620nm檢測底物的酶反應(yīng)程度。}
  • 詳細(xì)內(nèi)容
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè),制藥

1、實(shí)驗(yàn)原理

SRANKL試劑盒是一種酶聯(lián)放大的兩步夾心法免疫檢測試劑盒。在此實(shí)驗(yàn)中,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和未知樣品在包被了抗IGFBP-3單克隆抗體的微孔板中溫育。溫育之后洗板,再加入辣根過氧酶標(biāo)記的抗IGFBP-3抗體。第二次溫育后再洗板,再向微孔中加入TMB底物液。之后再加入酸性終止液,用雙波長450nm和620nm檢測底物的酶反應(yīng)程度。


檢測到的OD值直接與樣品中IGFBP-3的濃度成正比。實(shí)驗(yàn)使用了一套IGFB-3標(biāo)準(zhǔn)品,用標(biāo)準(zhǔn)的OD值對IGFBP-3的濃度可做出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,之后質(zhì)控品和未知樣品中的IGFBP-3濃度就可以從此標(biāo)準(zhǔn)曲線上定量得到。


2.成分

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3試劑盒為96孔檢測提供了足夠的試劑成份。每個試劑盒包括如下試劑成份:

試劑

體積/規(guī)格

顏色

重溶

酶標(biāo)板,96孔,包被了抗IGFBP3單克隆抗體

96孔

藍(lán)色

即用型

酶聯(lián)物

HRP標(biāo)記的抗IGFBP3單克隆抗體于Tris緩沖液中,及牛血清蛋白和百里香酚

1瓶

0.5ml

紅色

使用酶聯(lián)物緩沖液20倍稀釋

酶聯(lián)物緩沖液

Tris緩沖液,及牛血清蛋白和百里香酚

1瓶

10ml

紅色

即用型

標(biāo)準(zhǔn)品1—5

于磷酸鹽緩沖液中,及牛血清蛋白和百里香酚。準(zhǔn)確的值請看瓶上標(biāo)簽

標(biāo)準(zhǔn)品是預(yù)稀釋的

使用稀釋緩沖液作為零標(biāo)準(zhǔn)品

5瓶

凍干品

黃色

加入1ml蒸餾水

稀釋緩沖液

磷酸鹽緩沖液及牛白蛋白、牛血清和百里香酚

1瓶

100ml

黑色

即用型

質(zhì)控品1、2

含人血清及百里香酚

質(zhì)控品是預(yù)稀釋

2瓶

凍干品

銀色

加入1ml蒸餾水

濃縮的洗滌液


1瓶

10ml

棕色

使用蒸餾水進(jìn)行200倍稀釋(建議使用一個電磁攪拌器)

TMB底物液

四甲基聯(lián)苯胺

1瓶

12ml

白色

即用型

終止液

Hcl 1.0N

1瓶

12ml

黑色

即用型

注意:使用稀釋緩沖液作為零標(biāo)準(zhǔn)品

標(biāo)準(zhǔn)品的校準(zhǔn)是使用NIBSC/WHO 重溶的IGFBP-3,參考試劑編號93/560。


3.沒有提供的材料

1 好質(zhì)量的蒸餾水

2 移液器 50ul、100ul、1ml(使用一次性吸嘴)

3 塑料管,用于樣本稀釋

4 混合器

5 電磁攪拌器

6 洗板機(jī)

7 450nm酶標(biāo)儀,參考波長650nm。


4.準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品:

使用1ml的蒸餾水重溶標(biāo)準(zhǔn)品。使用稀釋緩沖液作為零標(biāo)準(zhǔn)品。

質(zhì)控品:

使用1ml的蒸餾水重溶質(zhì)控品。

酶聯(lián)物:

制備適當(dāng)體積酶聯(lián)物溶液,例如:100ul的20倍濃縮的酶聯(lián)物加至2ml的酶聯(lián)物緩沖液中。使用混合器混勻,建議臨時制備。

洗滌液:

制備適當(dāng)體積的即用型洗滌液,通過加入199份的蒸餾水至1份的200倍濃縮的洗滌液,使用一個電磁攪拌器混勻。


5.樣本的制備

血清必須保存在2-8℃

如果實(shí)驗(yàn)沒有在24小時內(nèi)進(jìn)行,建議分裝保存在-20℃,避免反復(fù)凍融。使用前,所有的樣本應(yīng)該平衡至室溫。建議使用前混勻樣本。

不能使用溶血的樣本。


6.SRANKL試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:

  1. 在塑料試管中標(biāo)記好每個樣本

  2. 每管加入1ml的稀釋緩沖液

  3. 將10ul的樣本加入試管中

  4. 混勻樣本,重溶好標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品

  5. 每次實(shí)驗(yàn)選擇好所需要的板條。不使用的板條應(yīng)重新與干燥劑一起于密封袋中,保存在2-8℃。

  6. 將板條固定于板架上

  7. 移取100ul 的稀釋緩沖液當(dāng)零標(biāo)準(zhǔn)品


 加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、稀釋的樣本至相應(yīng)的孔中

  1. 每孔加入50ul的酶聯(lián)物溶液

  2. 在室溫下溫育2小時

  3. 倒出孔中溶液

  4. 洗板3次

  5. 在洗板后的15分鐘內(nèi),每孔加入100ul的顯色劑

  6. 于室溫下溫育30分鐘

  7. 每孔加入100ul的終止液

  8. 在1小時內(nèi)450nm酶標(biāo)儀下讀數(shù)(參考波長為630nm或者650nm)。

7.應(yīng)用范圍

該試劑盒為酶聯(lián)免疫試驗(yàn)檢測人血清中的胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3(IGFBP-3)。

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